一、原理不同

1. 薄膜過(guò)濾法

• 核心原理：通過(guò)過(guò)濾裝置將一定體積的供試品溶液通過(guò)微孔濾膜（孔徑一般為 0.45μm），將微生物截留到濾膜表面，然后將濾膜轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，通過(guò)計(jì)數(shù)濾膜上生長(zhǎng)的菌落數(shù)來(lái)測(cè)定供試品中的微生物含量。

• 關(guān)鍵點(diǎn)：利用濾膜的截留作用濃縮微生物，適用于微生物含量較低或含有抑菌成分的供試品。

2. 平皿法

• 核心原理：將一定量的供試品溶液直接接種到瓊脂培養(yǎng)基平板中，通過(guò)培養(yǎng)后計(jì)數(shù)平板上生長(zhǎng)的菌落數(shù)來(lái)確定微生物含量。平皿法又可分為傾注法和涂布法：

• 傾注法：將供試品溶液與冷卻至 45℃左右的培養(yǎng)基混合后倒入平皿，凝固后培養(yǎng)。

• 涂布法：將供試品溶液均勻涂布于已凝固的培養(yǎng)基表面，培養(yǎng)后計(jì)數(shù)。

• 關(guān)鍵點(diǎn)：直接利用培養(yǎng)基與供試品接觸，適用于不含抑菌成分且微生物含量較高的供試品。

二、操作流程不同

1. 薄膜過(guò)濾法

1. 準(zhǔn)備濾膜和過(guò)濾裝置：選擇合適孔徑的濾膜，安裝過(guò)濾裝置并滅菌。

2. 過(guò)濾供試品：將供試品溶液倒入過(guò)濾裝置，通過(guò)抽濾使溶液通過(guò)濾膜，微生物截留在濾膜上。

3. 沖洗濾膜：用無(wú)菌沖洗液沖洗濾膜，去除供試品中的抑菌成分（若有）。

4. 轉(zhuǎn)移濾膜：將濾膜無(wú)菌轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)基表面（如營(yíng)養(yǎng)瓊脂、玫瑰紅鈉瓊脂等），濾膜表面朝上。

5. 培養(yǎng)與計(jì)數(shù)：倒置培養(yǎng)皿，按規(guī)定條件培養(yǎng)后，計(jì)數(shù)濾膜上的菌落數(shù)。

2. 平皿法（以傾注法為例）

1. 制備供試品溶液：將供試品溶解或稀釋成適宜濃度的溶液。

2. 稀釋與接種：取一定體積的供試品稀釋液加入滅菌平皿中。

3. 傾注培養(yǎng)基：向平皿中倒入冷卻至 45℃左右的培養(yǎng)基，混勻，待凝固。

4. 培養(yǎng)與計(jì)數(shù)：倒置培養(yǎng)皿，培養(yǎng)后計(jì)數(shù)平板上的菌落數(shù)。

三、適用場(chǎng)景不同

1. 薄膜過(guò)濾法

• 適用情況：

• 供試品含有抑菌成分（如抗生素、防腐劑等），需通過(guò)沖洗去除抑菌作用。

• 供試品微生物含量較低（如注射劑、純化水等），需通過(guò)過(guò)濾濃縮微生物以提高檢測(cè)靈敏度。

• 液體供試品（如口服液、注射液、飲料等），過(guò)濾操作便捷。

• 不適用情況：固體或黏性供試品需先溶解或處理成液體，操作相對(duì)復(fù)雜；含大量顆粒雜質(zhì)的供試品可能堵塞濾膜。

2. 平皿法

• 適用情況：

• 供試品不含抑菌成分或抑菌成分已被中和。

• 微生物含量較高的供試品（如食品、化妝品原料等），可直接稀釋后檢測(cè)。

• 固體供試品（如片劑、粉劑等），需先制成均勻混懸液。

• 不適用情況：含強(qiáng)抑菌成分的供試品，直接接種可能導(dǎo)致微生物生長(zhǎng)被抑制，結(jié)果不準(zhǔn)確。

四、優(yōu)缺點(diǎn)對(duì)比

五、注意事項(xiàng)

1. 薄膜過(guò)濾法：

• 濾膜孔徑需匹配微生物大小（一般 0.45μm 可截留細(xì)菌、真菌）。

• 沖洗次數(shù)和沖洗液體積需根據(jù)供試品特性優(yōu)化，避免過(guò)度沖洗導(dǎo)致微生物損失。

2. 平皿法：

• 傾注法需注意培養(yǎng)基溫度，避免高溫殺死微生物。

• 涂布法需確保涂布均勻，避免菌落重疊影響計(jì)數(shù)。

總結(jié)

• 選擇依據(jù)：根據(jù)供試品性質(zhì)（是否含抑菌成分、劑型、微生物含量高低）、檢測(cè)目的（如微生物限度檢查、無(wú)菌檢查）及實(shí)驗(yàn)室條件選擇合適的方法。

• 應(yīng)用趨勢(shì)：薄膜過(guò)濾法因能處理復(fù)雜樣品且靈敏度高，在藥品和高要求領(lǐng)域應(yīng)用更廣泛；平皿法因操作簡(jiǎn)便，在食品、化妝品初篩中更常見(jiàn)。